زیست شناسی 90

شرح آزمایش:درابتدا لوپ رااستریل میکنیم باقراردادن روی شعله.بعدازاینکه لوپ قرمزشدان راازروی شعله برمیداریم ومیگذاریم تاسرد شودبعد بوسیله لوپ مقداری نمونه ازمحیط کشت برمیداریم ولایه نازکی ازآن راروی اسلاید قرار میدهیم درمرحله بعد لام حاوی نمونه رادرهای خشک میگیریم تا خشک شود بعد برای فیکس کردن لام را بین ۳تا۴بار روی شعله عبور میدهیم تا باکتریها از روی لام جدا نشوند.اولین رنگی که اضافه میکنیم کریستال ویولت است که به غشا ودیواره باکتری می چسبدبعدازیک دقیقه لام را باآب مقطر شستشو میدهیم بعد رنگ آیوداین راروی لام میریزیم آیوداین با کریستال ترکیب میشود و کمپلکس رنگی بزرگ تشکیل میدهدکه باعث تقویت وپایداری رنگ وبالا بردن زمان رنگ زدایی میشود بعد از۱دقیقه رنگ آیوداین رابا آب مقطر شستشو میدهیم درمرحله سوم اسید الکل رابرروی لام قرار میدهیم اسید الک درباکتریهای گرم منفی که مقدار زیادی چربی دارن باعث میشود که چربیها حل شوند ومنافذ بزرگی را ایجاد میکند وباعث افزایش تراوایی غشا وخروج کمپلکس رنگی میشود درباکتریهای گرم +که مقدار کمی چربی دارند دیواره را بی آب میکندوباعث کاهش تراوایی غشا ومانع خروج کپلکس رنگی میشود...وبعدا۲۰تا۳۰پانیه با آب مقطر شستشو میدهیم آخرین رنگی که اضافه میکنیم سفرانین میباشد که درباکتریهای گرم - چون منافذ بزرگی دارند سفرانین وارد سلول میشود ورنگ باکتری قرمز میشود امادر باکتریهای گرم +چون منافذی ندارند سفرانین وارد دیواره نمشود پس باکتری به رنگ قبلی خود می ماند یعنی بنفش . بعداز۱دقیقه رنگ رابا آب مقطر شستشو میدهیم درآخر آزمایش جهت مشاهده لام درزیر میکروسکوپ ان راخشک میکنیم وبا بزرگ نمایی۴و۱۰و۴۰مشاهده میکنیم برای بررسی با بزرگنمایی ۱۰۰از روغن ایمرسیون استفاده میکنیم جواب سوال این که چرا باکتری های گرم مثبت وقتی با الکل شستوشومیدهیم مقداری رنگ ابی خارج میشود؟ در متن هست